%0 Journal Article %T 朱砂叶螨乙酰胆碱酯酶基因的克隆与特征分析 %A 冯晓姣 %A 卜春亚 %A 师光禄 %A 高品 %A 王有年 %A 彭博 %A 李金玲 %A 韩晶玉 %J 应用与环境生物学报 %P 751-758 %D 2014 %R 10.3724/SP.J.1145.2014.01051 %X 乙酰胆碱酯酶(ache)是有机磷和氨基甲酸酯类杀虫(螨)剂的主要作用靶标,为建立以朱砂叶螨(tetranychuscinnabarinus)ache为靶点的杀螨剂体外筛选体系,本研究拟克隆朱砂叶螨ache基因,并分析其特征.采用同源基因克隆及race技术克隆基因,通过荧光定量pcr分析其表达特征.结果获得朱砂叶螨ache的cdna序列长为2512bp,其中开放阅读框(orf)为2064bp,编码687个氨基酸,n端有信号肽,剪切位点在甲硫氨酸开始的第74-75个氨基酸残基之间,c端有糖酯锚定结构,genbank登录号为agi96546.1.序列分析显示朱砂叶螨与其他蜱螨目的ache有高度的同源性,特别与同属叶螨属的二斑叶螨(tetranychusurticae)ache的同源性最高,但氨基酸序列比较分析显示两者酶的催化特性可能存在区别.朱砂叶螨不同发育期ache的转录水平比较分析显示幼螨期的表达量最高,且从幼螨期开始表达量逐渐下降,成螨期最低.本研究表明朱砂叶螨与二斑叶螨的ace1有较高的同源性,但酶特性存在差异,朱砂叶螨不同发育时期ace1基因表达水平的不同可能与不同发育期螨的习性和代谢特性有关.图7参20 %K 朱砂叶螨 %K 乙酰胆碱酯酶 %K 基因克隆 %K 荧光定量 %U http://www.cibj.com/oa/DArticle.aspx?type=view&id=201401051