%0 Journal Article
%T 植物乳杆菌bbe7的胆盐水解酶基因在毕赤酵母中的分泌表达
%A 董自星
%A 张娟
%A 李炳薰
%A 堵国成
%A 陈坚
%A 李华钟
%J 应用与环境生物学报
%P 107-111
%D 2014
%R 10.3724/SP.J.1145.2014.00107
%X 由于用大肠杆菌对植物乳杆菌来源的bsh基因进行胞内和胞外表达时，它们很容易形成包涵体，而且大肠杆菌的内毒素会显限制bsh的应用，所以利用毕赤酵母这一高效的表达系统对其进行了分泌表达.首先用融合pcr的方法将信号肽α-factor与bsh连接，然后再克隆到质粒ppic9k上，得到重组质粒ppic9k-α-factor-bsh.重组质粒经过salⅰ线性化后转化至毕赤酵母gs115.表达产物经sds-page分析和酶活测定发现，重组bsh的相对分子质量（mr）和胞外酶活分别为37.0×103和1.08uml-1.通过正交实验[l9（34）]对发酵条件优化后，胞外总酶活达到2.69uml-1，比原来提高了1.49倍.研究为胆盐水解酶的分离纯化、酶学性质研究以及大规模生产奠定了一定的基础.
%K 植物乳杆菌bbe7
%K 胆盐水解酶
%K 毕赤酵母
%K 分泌表达
%K 正交试验设计
%U http://www.cibj.com/oa/DArticle.aspx?type=view&id=201308003