%0 Journal Article %T 甲基对硫磷降解菌gfp标记菌株的构建 %A 邱珊莲 %A 崔中利 %A 樊奔 %A 戴青华 %A 李顺鹏 %J 应用与环境生物学报 %P 778-781 %D 2004 %X 摘要用sau3aⅰ酶切甲基对硫磷降解菌dll?1总dna,与bamhⅰ酶切的启动子探针载体probe-gfp酶连,转化e.colidh5α,在选择性平板lb(ampr)上从大约1×104个菌落筛选到50个含启动子片断的阳性克隆.挑选其中一个阳性克隆,将启动子片断克隆到pij2925和pbbr-mcs2上构建成重组质粒pijgfp和广宿主标记载体pbbrgfp.然后将pijgfp载体上的启动子片断克隆到广宿主载体ptr102上,获得第二个广宿主标记载体ptrgfp.将ptrgfp和pbbrgfp通过三亲接合分别标记于dll?1得到两株标记菌,即dlltr和dllbr.通过激光共聚焦显微镜观察和软件lasersharpversion3.2分析发现ptrgfp在e.coli中表达很强而在dll?1中表达很弱,而pbbrgfp正好相反.图5表2参12 %K 关键词甲基对硫磷降解菌 %K 启动子 %K 标记载体 %K 标记菌 %K gfp %U http://www.cibj.com/oa/DArticle.aspx?type=view&id=1244