%0 Journal Article %T 甘薯lea2基因的克隆与表达分析 %A 陈娇 %A 姜玉松 %A 张义正 %A 谭雪梅 %J 应用与环境生物学报 %P 204-210 %D 2014 %R 10.3724/SP.J.1145.2014.00204 %X 胚胎发育晚期丰富蛋白(lateembryogenesisabundant,lea)是植物在逆境胁迫下产生的一种应激蛋白质,具有较高的亲水性和热稳定性,与植物抗逆功能密切相关,研究lea家族基因对于甘薯抗逆性分子育种具有重要意义.通过对甘薯(徐薯18)转录组数据库搜寻时发现编码lea2的转录本,随后对该转录本进行了克隆和测序分析,利用数字表达谱(digitalgeneexpressionprofiling,dge)和半定量rt-pcr分析了ib-lea2在不同组织和不同发育阶段的表达图谱.为进一步了解ib-lea2在生物体响应盐胁迫中的作用,将ib-lea2连接原核表达载体pet-32a,用大肠杆菌bl21(de3)菌株进行盐胁迫的耐受分析.结果显示:ib-lea2完整的开放阅读框(orf)长度为942bp,编码313个氨基酸残基.进一步研究发现,在甘薯组织内同时存在3个高度同源的lea2基因型(核苷酸序列>99%),分别命名为ib-lea2a、ib-lea2b和ib-lea2c.数字表达谱和半定量rt-pcr的结果显示ib-lea2在不同组织和发育阶段具有不同的表达图谱,在茎中的表达量远远高于叶和根.大肠杆菌bl21(de3)菌株盐胁迫的结果显示,较之对照菌株,表达ib-lea2的菌株能够更好地耐受高浓度的nacl.研究表明,ib-lea2对盐胁迫有一定的响应能力,能够保护细胞免受高盐的毒害. %K 甘薯 %K lea2 %K 基因克隆 %K 数字表达谱 %K 盐胁迫 %U http://www.cibj.com/oa/DArticle.aspx?type=view&id=201309023