%0 Journal Article
%T 定点突变对扩展青霉脂肪酶热稳定性的改善
%A 蔡少丽
%A 邹有土
%A 黄建忠
%A 林琳
%J 应用与环境生物学报
%P 43-47
%D 2013
%R 10.3724/SP.J.1145.2013.00043
%X 利用重叠延伸pcr方法对扩展青霉脂肪酶基因进行体外定点突变，构建了k115r与随机突变体ep8双突变的重组质粒pao815-ep8-k115r.将该质粒电转化到毕赤酵母gs115中进行异源表达，获得双突变体脂肪酶pel-ep8-k115r-gs.与野生型脂肪酶pel-gs和随机突变体脂肪酶pel-ep8-gs进行比较，发现双突变体脂肪酶pel-ep8-k115r-gs在40℃温浴30min后残余酶活为89%，比野生型脂肪酶pel-gs和随机突变体脂肪酶pel-ep8-gs分别提高54%和27%；双突变体脂肪酶pel-ep8-k115r-gs的tm值为42.2℃，比野生型脂肪酶pel-gs提高3.5℃，比随机突变脂肪酶pel-ep8-gs提高2.0℃.研究结果表明对扩展青霉脂肪酶的分子改造能提高其热稳定性.
%K 扩展青霉
%K 脂肪酶
%K 定点突变
%K 毕赤酵母
%K 热稳定性
%U http://www.cibj.com/oa/DArticle.aspx?type=view&id=201112049