%0 Journal Article %T 蔗糖富集环境土壤微生物宏基因组分析及蔗糖水解相关酶基因克隆 %A 杜丽琴 %A 庞浩 %A 胡媛媛 %A 韦宇拓 %A 黄日波 %J 应用与环境生物学报 %P 403-407 %D 2010 %R 10.3724/SP.J.1145.2010.00403 %X 蔗糖水解酶是蔗糖转化生成生物质能源的关键酶,且还具有重要的转糖苷功能.针对蔗糖富集的土壤环境,利用未培养的宏基因组技术对蔗糖水解相关的酶基因进行克隆.首先使用微生态分子技术对蔗糖富集的土壤样品进行分析,在可信区间为95%的情况下,样品覆盖率为20%(c指数为0.2),speciesrichness指数为235.0,shannonindex为5.2889,说明这个蔗糖富集样品中的微生物来源具有广泛性.然后使用宏基因组技术构建这个土壤样品中微生物的dna文库,成功构建一个包含约100000个克隆的大片段dnafosmid文库.对文库中的fosmid质粒进行随机测序,发现质粒的外源dna与已报道的dna都没有同源性,文库所克隆的dna都来源于仍没有被研究的微生物.使用蔗糖作为唯一碳源对文库进行筛选,获得了能水解蔗糖的克隆.在蔗糖水解能力最强的两个克隆中所包含的蔗糖水解酶与genbank数据库中已知蔗糖酶的相似性分别为38%和68%.图2表2参27 %K 宏基因组 %K 环境dna %K dna文库 %K 细菌多样性统计技术 %K 蔗糖水解酶 %U http://www.cibj.com/oa/DArticle.aspx?type=view&id=200907044