%0 Journal Article
%T 人神经营养因子-3基因的亚克隆及其基因工程细胞模型的建立
%A 常红
%A 郭梦和
%A 郭坤元
%A 李永贺
%J 南方医科大学学报
%P 805-808
%D 2004
%X 目的亚克隆人神经营养因子-3(humanneurotrophin-3,nt3)并转染至体外培养的人骨髓间充质干细胞(bm-mscs),建立能够表达和分泌nt3的基因工程细胞模型。方法采用低糖dmem培养液+10%胎牛血清体外培养bm-mscs,流式细胞仪分析其表面标记;构建真核表达载体pcdna3.1(+)/nt3并通过脂质体介导转染bm-mscs;收集部分细胞提取其中的总rna,经逆转录pcr检测nt3基因表达;利用培养上清液体外孵育毛细胞以鉴定其生物学活性。结果bm-mscs表达cd13、cd29、cd59,不表达cd11、cd14、cd31、cd34、cd45、cd80、cd86、cd117、hla-dr;pcdna3.1(+)/nt3转染bm-mscs后,能够表达和分泌nt3,并具有生物学活性,可促进离体的豚鼠耳蜗毛细胞存活。结论在体外建立表达nt3基因并分泌nt3的基因工程细胞是可行的。
%K 神经营养因子-3/分泌
%K 骨髓间充质干细胞/遗传学
%K 转染
%U http://www.j-smu.com/oa/darticle.aspx?type=view&id=20040727