%0 Journal Article %T 柯萨奇病毒a16型vp1~vp4基因克隆及其表达产物的抗原相关性分析 %A 宋远斌 %A 何思杰 %A 余楠 %A 陈欣欣 %A 王斌 %A 车小燕 %A 曾其毅 %J 南方医科大学学报 %D 2012 %X 目的克隆并表达柯萨奇病毒a16型vp1~vp4蛋白基因,初步分析其抗原相关性。方法抽提病毒rna,经rt-pcr方法分别扩增出vp1~vp4蛋白基因片段,经克隆后,在qia表达系统中表达,表达产物经8mol/l尿素洗涤及镍柱亲和层析纯化后,用柯萨奇病毒a16型病毒免疫兔血清及肠道病毒71型病毒免疫兔血清对重组蛋白进行westernblotting及elisa分析其抗原相关性及交叉反应性。结果成功构建的重组质粒pqe30a/vp1~vp4并经iptg诱导,重组蛋白vp1~vp4高效表达并纯化成功,经westernblotting及elisa证实重组蛋白vp1~vp4可以被cva16免疫兔血清特异识别,部分与肠道病毒71型免疫血清存在交叉反应。结论在大肠杆菌m15中高效表达出柯萨奇病毒a16型vp1~vp4蛋白,经纯化产物具有较强的抗原反应性。 %K 柯萨奇病毒a16型 %K vp1蛋白 %K vp2蛋白 %K vp3蛋白 %K vp4蛋白 %K 克隆 %K 原核表达 %K 抗原反应性 %U http://www.j-smu.com/oa/darticle.aspx?type=view&id=2012121713