%0 Journal Article
%T 华支睾吸虫钙调节蛋白的生物学特性及与肝纤维化的关系
%A 郑明慧
%A 胡坤华
%A 刘炜
%A 余新炳
%J 南方医科大学学报
%D 2015
%X 目的对华支睾吸虫成虫（clonorchissinensis,cs）钙调节蛋白（cam）进行生物学及功能分析，以确定其在肝纤维化中的作用。方法从cscdna质粒文库中寻找cscam全长序列，以blastx搜索其同源序列并进行比对分析。以生物信息学进行同源比对、理化性质分析及功能域预测。以分子生物学方法进行原核克隆，大肠杆菌表达，亲和层析纯化，并将纯化蛋白免疫大鼠，产生多克隆抗体。elisa检测cscam抗体滴度及产生曲线。免疫印迹实验分析cscam重组蛋白纯化及其抗体识别效果。免疫组化分析其组织定位；腹腔注射法建立cscam致大鼠肝纤维化模型。结果重组、表达及纯化了cscam，其编码150位氨基酸，理论相对分子质量23400。结构域预测其具有ef手位模序。pet-30a-cscam重组质粒其目的蛋白表达于宿主菌bl21e.coli上清，相对分子质量约23400。总igg抗体滴度于2~4周达较高峰，效价大于1∶51200。免疫组织化学定位显示cscam在成虫睾丸表达丰富。cscam腹腔注射大鼠的肝脏均显示不同程度病变，he染色可见炎症反应较严重，可见气球样变、门管区炎及碎片状坏死；网状纤维染色显示小胆管周围胶原增生，有轻到中度纤维化。结论cscam促进大鼠肝脏炎症病变及纤维化的作用，提示其可能参与了华支睾吸虫病致肝纤维化的作用。
%K 华支睾吸虫
%K 钙调节蛋白
%K 肝纤维化
%U http://www.j-smu.com/oa/darticle.aspx?type=view&id=201505659