%0 Journal Article
%T 人gfp-awp1融合基因载体的构建及其在293细胞中的表达
%A 曹永宽
%A 莫永炎
%A 田伏洲
%A 刘亚伟
%A 邓鹏
%A 秦清和
%A 姜勇
%J 南方医科大学学报
%D 2005
%X 目的克隆、构建绿色荧光蛋白(gfp)-awp1(associatedwithproteinkinasecrelatedkinase1,awp1)表达载体,观察awp1在293细胞中表达和定位。方法采用逆转录pcr(rt-pcr)法从人ecv304内皮细胞中扩增awp1cdna编码区,并将其重组于gfp表达载体pegfp-c2中。经酶切、序列鉴定分析后,将该重组质粒通过dotap脂质体介导,转染293细胞。荧光显微镜观察awp1在细胞内的表达和分布。结果gfp-awp1融合基因表达载体经酶切鉴定和测序分析确认构建成功,并在293细胞中获得了高效表达。荧光显微镜下,在不携带外源基因的空载体pegfp-c2转染的对照组293细胞,绿色荧光均匀分布于整个细胞中;在重组质粒pegfp-c2/awp1转染的293细胞,绿色荧光弥散分布于细胞质内。结论成功构建gfp-awp1融合基因表达载体并表达于293细胞胞质中。
%K awp1
%K 绿色荧光蛋白
%K 293细胞
%U http://www.j-smu.com/oa/darticle.aspx?type=view&id=20050213