%0 Journal Article
%T 人aβ42重组抗原的融合表达及aβ抗体的检测
%A 张革
%A 王烈峰
%A 汪华侨
%A 姚志彬
%J 南方医科大学学报
%P 160-164
%D 2005
%X 目的原核表达β-淀粉样蛋白(aβ42)抗原,建立检测aβ抗体的间接elisa技术。方法化学合成aβ42基因两个互补片段,通过pcr构建人aβ42基因,克隆至pgex-2t表达载体中,原核表达并亲和纯化gst-aβ42融合蛋白。westernblotting检测其抗原特异性。以gst-aβ42和aβ42肽分别为包被抗原,间接elisa法检测aβ42免疫的大鼠血清中aβ抗体。结果原核表达的可溶性gst-aβ42融合蛋白相对分子质量为31000,经亲和纯化后,融合蛋白产量为800mg/l菌液,纯度大于95%;westernblotting证实纯化的融合抗原与aβ单抗特异反应;以gst-aβ42为包被抗原,间接elisa法检测aβ抗体灵敏度为2ng/ml;以gst-aβ42和化学合成的aβ42分别为包被抗原,间接elisa法检测aβ42肽免疫大鼠血清中aβ抗体滴度,两者比较差异无显著性(p>0.05)。结论原核表达的gst-aβ42融合蛋白可替代昂贵的化学合成的aβ42肽抗原,用于检测aβ抗体。
%K 淀粉样β蛋白
%K 融合表达
%K 基因表达
%K 克隆
%K 分子
%K 酶联免疫吸附测定
%U http://www.j-smu.com/oa/darticle.aspx?type=view&id=20050209