%0 Journal Article %T 细胞角蛋白8gfp/puro双标干涉慢病毒系统的构建及对细胞凋亡的影响 %A 金延超 %A 尹荣华 %A 郑巍薇 %A 孔祥祯 %A 詹轶群 %A 杨晓明 %A 李长燕 %J 南方医科大学学报 %D 2013 %X :目的构建细胞角蛋白8(ck8)的双标慢病毒干涉载体,获得高滴度慢病毒颗粒,感染hct116细胞建立稳定株,检测ck8敲低对细胞凋亡的影响。方法将ck8的sirna序列插入慢病毒表达载体gv248,并与包装质粒pmd、spa共转染293t细胞,36、48h分两次收集慢病毒上清,应用流式细胞术检测病毒滴度。获得的病毒感染hct116细胞,用嘌呤霉素筛选阳性细胞,westernblotting检测干涉效果。采用annexinv/pi染色检测干涉ck8对化疗药物顺铂诱导的细胞凋亡的影响。结果与结论成功构建ck8干涉慢病毒载体并得到干涉稳定株,在hct116细胞中干涉ck8使细胞对顺铂引起的凋亡更加敏感。 %K 细胞角蛋白8 %K gfp/puro双标慢病毒 %K rnai %K 凋亡 %K 顺铂 %U http://www.j-smu.com/oa/darticle.aspx?type=view&id=2013121761