%0 Journal Article
%T 蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型12负性调控心脏herg钾通道电流
%A 林吉进
%A 刘树楷
%A 郑方芳
%A 马青艳
%A 余宏
%A 任莉
%A 沈心远
%J 南方医科大学学报
%D 2013
%X 目的研究蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型12（ptpn12）对心脏herg钾通道电流的调控作用。方法（1）质粒构建和基因转染：pcr技术构建各种质粒，应用脂质体将各种质粒转染hek293细胞，经g418筛选获得稳定表达的细胞株；（2）应用抗ptpn12抗体进行westernblotting分析检测ptpn12的表达；（3）细胞电生理检测：应用膜片钳技术检测单独表达herg组（hek293/herg细胞）、ptpn12过度表达组（将pcdna3.1-ptpn12-rfp转染hek293/herg细胞）、pao处理组（ptpn12/herg组基础上加入抑制剂pao）、herg突变组（将pcdna3.1-ptpn12-rfp转染hek293/hergy327a-y700a-y845a细胞株）的herg钾通道电流。结果（1）成功构建herg突变质粒和pcdna3.1-ptpn12-rfp质粒，并获得稳定表达的细胞株；（2）共转染pcdna3.1-ptpn12-rfp质粒的hek293/herg细胞在荧光显微镜下可观察到ptpn12-rfp在细胞中的表达，westernblotting可检测到ptpn12的表达；（3）ptpn12过度表达组脉冲电流密度明显低于对照组（p<0.01），pao处理组和herg突变组电流密度明显高于ptpn12/herg组（p<0.01）。结论ptpn12对心脏herg钾通道电流具有明显负性调控作用，其可能机制是ptpn12减弱了herg钾通道酪氨酸磷酸化程度。这一发现有助于更深刻理解herg钾通道调控机制和长qt综合征发病机制。
%K 长qt综合征
%K herg钾通道
%K 蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型12
%K 膜片钳技术
%U http://www.j-smu.com/oa/darticle.aspx?type=view&id=2013121718