%0 Journal Article
%T 小鼠pgrp-l分子pgrp结构域基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
%A 何智
%A 左大明
%A 陈政良
%J 南方医科大学学报
%P 472-475
%D 2006
%X 目的克隆小鼠长型肽聚糖识别蛋白(pgrp-l)的pgrp结构域基因并在大肠杆菌中表达。方法采用rt-pcr技术,从balb／c小鼠肝组织总rna中扩增pgrp-l的pgrp结构域基因片段,将其克隆入pucm-t载体,以pcr、酶切和测序进行鉴定。以pcr从含pgrp结构域基因的重组质粒中扩增目的基因片段,插入表达质粒pqe-30构建重组表达质粒,转化大肠杆菌m15,诱导表达并纯化目的蛋白。结果rt-pcr扩增得到约500bp的基因片段,将其与pucm-t载体连接构建成重组质粒pmpgrpd,其酶切图谱与计算机分析结果一致,该基因片段长518bp,序列与genbank中相应基因序列相同。构建成重组表达载体pqe-pgrpd,在大肠杆菌m15中表达,表达产物主要存在于菌体裂解液上清中,为一相对分子质量约29000的可溶性蛋白。结论成功克隆并原核表达了小鼠pgrp-l分子pgrp结构域基因,为pgrp-l分子的研究奠定了一定基础。?
%K 小鼠肽聚糖识别蛋白
%K pgrp结构域
%K 基因克隆
%K 原核表达
%U http://www.j-smu.com/oa/darticle.aspx?type=view&id=200604029