%0 Journal Article %T 肠出血型大肠埃希菌o157:h7ppk基因缺失株的构建及其生物学特性分析 %A 韩朋 %A 孙琦 %A 赵素慧 %A 张其威 %A 万成松 %J 南方医科大学学报 %D 2014 %X 目的利用red重组系统构建肠出血型大肠埃希菌(ehec)o157:h7ppk基因缺失株,并研究其生物特性。方法设计并合成一对同源臂引物,每条引物5’端与ppk基因同源,3’端与卡那霉素抗性基因同源,扩增卡那霉素抗性基因片段;制备含有pkd46质粒的eheco157:h7edl933w感受态细菌,然后将该抗性基因片段电击转化入制备的感受态菌株中;利用pkd46介导的red重组系统,通过同源重组替换eheco157:h7edl933wppk基因,pcr和测序验证;通过革兰染色、测d600值、吉姆萨染色比较eheco157:h7edl933w野生株和突变株的形态结构、生长能力和黏附性。结果构建了ppk基因缺失并含有卡那霉素抗性的eheco157:h7edl933w突变菌株(eheco157:h7edl933wδppk),初步探索了eheco157:h7edl933w野生株和突变株的生物学特性。结论本研究运用red重组系统构建了肠出血型大肠埃希菌o157:h7ppk基因缺失株,为进一步研究肠出血型大肠埃希菌中ppk基因的调控机制奠定了基础。 %K eheco157:h7 %K ppk基因 %K red重组系统 %K 基因突变 %U http://www.j-smu.com/oa/darticle.aspx?type=view&id=201406904