%0 Journal Article
%T hbv全基因c区突变株在永生化b淋巴母细胞系中的稳定表达
%A 张明霞
%A 周福元
%A 刁志宏
%A 何海棠
%A 侯金林
%A 骆抗先
%J 南方医科大学学报
%P 725-729
%D 2006
%X 目的构建携带v60、g87和l97突变位点的hbv全基因组真核表达载体,转染慢性hbv感染者永生化b淋巴母细胞系(lcls)。方法用定点突变技术将hbvp3.8ⅱ质粒c基因区3个氨基酸v60、g87、l97进行突变(p3.8ⅱ-v60,g87,l97),转化e.coli.xl1-blue感受态细胞扩增筛选,用限制性内切酶sacⅰ和kpnⅰ分别将野生型和突变型p3.8ⅱ质粒进行双酶切,插入ebv-plpp真核细胞表达载体,转染lcls,潮霉素稳定筛选后,鉴定目的基因在转染细胞能够稳定表达。结果与结论dna序列分析表明,野型hbvdna核心区第60、87、97位氨基酸发生了预期的突变,westernblotting和微粒子免疫荧光法证明转染的lcls能稳定表达hbv抗原,证实成功构建了预期细胞模型。?
%K 乙型肝炎病毒
%K 变异
%K 真核细胞表达载体
%K 永生化b淋巴母细胞
%U http://www.j-smu.com/oa/darticle.aspx?type=view&id=200606003