%0 Journal Article %T 人甲状旁腺素在甲醇毕赤酵母中的分泌表达 %A 王旭 %A 李霜 %A 刘志斌 %A 何冰芳 %J 南京工业大学学报(自然科学版) %P 45-48 %D 2004 %R 10.3969/j.issn.1671-7627.2004.04.011 %X 选用酵母偏爱的密码子,人工合成长度为282bp的人甲状旁腺素(hpth)基因,将其克隆于m13载体中,dna测序验证正确.通过pcr从含有hpth基因的m13载体获得了该基因,将其插入到含有aox1启动子和α因子信号肽序列的表达载体ppic9k中,构建了重组质粒ppic9k-hpth,电击法转化甲醇毕赤酵母(pichiapastoris)gs115菌株,经g418筛选得到高拷贝转化子,甲醇诱导表达,tricine-sds-page电泳结果表明在9.3kda处有明显的诱导蛋白带,与报道的hpth的相对分子质量相近;酶联免疫沉淀法(elisa)检测证明表达的蛋白具有hpth免疫活性为132ng/l. %K 甲状旁腺素 %K 毕赤酵母 %K 重组质粒 %K 分泌表达 %U http://zrb.njutxb.com/oa/DArticle.aspx?type=view&id=200404011