%0 Journal Article
%T 耐酸耐温α-淀粉酶基因在大肠杆菌中的功能表达
%A 王成华
%A 王青艳
%A 熊伍平
%A 廖思明
%A 何冰芳
%A 黄日波
%J 南京工业大学学报(自然科学版)
%P 20-26
%D 2012
%R 10.3969/j.issn.1671-7627.2012.03.004
%X 兼顾大肠杆菌与枯草芽孢杆菌密码子偏好性,优化获得了1个耐酸耐温淀粉酶的基因amycn1,并将其在大肠杆菌中实现了功能表达。纯化后的重组α-淀粉酶(amy1)表征结果表明:在最适ph5.5和最适温度75℃条件下表观米氏常数(km)值和催化效率(kcat/km)值分别为20.93g/l和98.20l/(g·s);低浓度的co2+(1mmol/l)可以提高30%的淀粉酶活力,mn2+抑制了大部分活力,包括ca2+在内的其他金属离子影响不显著;高浓度的edta(≥50mmol/l)抑制其活力;生物信息学分析表明,amy1具有α-淀粉酶家族典型的3-结构域分布,具有1个ca2+结合位点和5个zn2+结合位点,活性中心催化氨基酸残基d198和e222位于(β/α)8桶中β折叠片c端一侧。amy1优良的低ph耐受性和耐温性,有助于木薯淀粉生产燃料乙醇工业液化与糖化同步发酵工艺的实现。
%K 淀粉酶
%K 密码子偏好
%K 耐酸
%K 耐温
%K 表达
%U http://zrb.njutxb.com/oa/DArticle.aspx?type=view&id=20120304