%0 Journal Article
%T 溶氧反馈分批补料高密度培养枯草杆菌谷氨酰胺合成酶工程菌
%A 张锋
%A 王期
%A 李桂兰
%A 徐健红
%A 洪素丽
%A 岳玲
%A 冯志勇
%A 殷志敏
%J 南京师范大学学报(自然科学版)
%P 96-103
%D 2010
%X 为了建立枯草杆菌谷氨酰胺合成酶基因重组工程菌bl21/pet28b-glna的高密度培养工艺,首先以摇瓶培养为基础,对影响工程菌生长及目的蛋白表达的因素如培养基、ph值、诱导剂浓度及时间等进行优化,再扩大至biotech-5bg(5l)自动玻璃发酵罐培养,利用溶氧反馈补料策略进行分批补料,并在培养过程中保持20%~50%的溶解氧,7.0~7.5的ph,以及1.0g/l乳糖诱导12h,成功地进行了工程菌的高密度培养,最终细菌干重达到48.1g/l,目的蛋白的表达量占菌体蛋白总量的55%,粗提物酶比活为10.35u/mg,整个补料过程细菌比生长率稳定的控制在0.1h-1左右.
%K 谷氨酰胺合成酶
%K 重组大肠杆菌
%K 分批补料培养
%K 高密度培养
%U http://njsfdxzrb.paperonce.org/oa/darticle.aspx?type=view&id=20100220