%0 Journal Article
%T 杉木srap-pcr体系优化
%A 王新民
%A 郑仁华
%A 陈金慧
%A 赵亚琦
%A 徐阳
%A 王颖
%A 施季森*
%J 南京林业大学学报(自然科学版)
%P 15-20
%D 2014
%R 10.3969/j.issn.1000-2006.2014.01.003
%X 为建立杉木srap-pcr反应体系,利用l16(45)正交设计对影响杉木srap-pcr反应体系的mg2+、dntps、引物、taq酶和dna浓度5种因素的4个水平进行优化实验,结合正交直观分析和方差分析,对影响反应较大的mg2+、dntps和引物浓度进行单因素实验,最终确定杉木srap-pcr最佳的反应体系为:在20μl的pcr反应体系中,mg2+浓度为2.25mmol/l、dntps为0.15mmol/l、引物浓度为0.4μmol/l、taq酶为1.5μmol/min、模板dna为60ng,10×pcrbuffer2μl,不足部分用双蒸水补充至20μl。pcr反应程序的两步最适退火温度第1步为35℃,第2步为53℃。利用上述反应体系进行杉木pcr扩增,能得到清晰、稳定的条带。
%K 杉木
%K srap-pcr
%K 体系优化
%U http://nldxb.njfu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201401003