%0 Journal Article
%T 东方百合srap体系优化及引物筛选
%A 邱帅
%A 丁信誉
%A 席梦利*
%A 施季森*
%J 南京林业大学学报(自然科学版)
%P 6-10
%D 2013
%R 10.3969/j.issn.1000-2006.2013.03.002
%X 以东方百合商品种‘索蚌’(‘sorbonne’)和‘康斯坦撒’(‘constantsa’)及其f1代杂交群体为实验材料,从100对srap引物中筛选出59对扩增产物丰富、具有较高多态性的引物,同时对pcr反应体系进行了优化。采用正交设计,对mg2+、dntps、taq聚合酶及引物浓度进行4因素4水平优化,并在此基础上对mg2+、引物浓度和退火温度进行了单因素优化。结果表明,东方百合srap的最佳体系为:1×buffer,mg2+浓度2.7mmol/l,dntps浓度0.25mmol/l,引物浓度0.8μmol/l,taq聚合酶1.5μmol/min,模板dna60～100ng。srap两步反应最佳退火温度为第1步35℃,第2步退火59.3℃。最后用‘索蚌’、‘康斯坦撒’和部分f1植株对优化体系进行稳定性检测,发现所筛选出的59对引物在优化的体系下均有稳定的扩增产物。
%K 东方百合
%K 序列相关扩增多态性分子标记
%K 体系优化
%K 引物筛选
%U http://nldxb.njfu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201303002