%0 Journal Article %T 奶山羊pou1f1基因cds区的克隆、分析及原核表达 %A 李建华? %A 罗军? %A 张晓? %A 樊睿? %A 王伟? %A 郝娟? %A 赵旺生? %J 西北农林科技大学学报(自然科学版) %P 41-45 %D 2010 %X 【目的】克隆奶山羊垂体特异性转录因子pou1f1基因cds区,并对其进行生物信息学分析和原核表达。【方法】采集关中奶山羊垂体组织,提取其总rna,根据绵羊pou1f1基因序列,利用反转录rt-pcr克隆pou1f1基因cds区,对其进行生物信息学分析,并构建原核表达载体pet-32a-pou1f1,在大肠杆菌bl21(de3)plyss中进行表达。【结果】关中奶山羊pou1f1基因(genbank登陆号:fj547813)开放读码框由876个碱基组成,编码291个氨基酸,基中包含1个pou-specific结构域(从第124~198个氨基酸)和1个homeobox结构域(从第214~276个氨基酸);奶山羊pou1f1基因cds区核苷酸序列与绵羊(nm_001009350)、牛(nm_174579)、人(nm_000306)和小鼠(nm_008849)的同源性分别为98%,97%,91%和86%,其氨基酸序列与绵羊、牛、人和小鼠的同源性分别为98%,98%,96%和92%;成功构建了重组质粒pet-32a-pou1f1的原核表达系统,并在体外条件下诱导表达出融合蛋白his-pou1f1。【结论】pou1f1基因编码的功能氨基酸在奶山羊、绵羊、牛、人和小鼠上高度保守,推测奶山羊pou1f1基因与其他物种的pou1f1基因具有相似的功能。 %K 关中奶山羊 %K pou1f1 %K 克隆 %K 生物信息学分析 %K 原核表达 %U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20100108&flag=1