%0 Journal Article %T 山葡萄vacbf1转录因子基因的克隆与表达分析 %A 王法微? %A 刘 洋? %A 吴学彦? %J 西北农林科技大学学报(自然科学版) %P 86-92 %D 2013 %X 【目的】克隆山葡萄(vitisamurensis)cbf1转录因子基因(vacbf1),为其功能的深入研究及其在植物抗寒基因工程中的应用奠定基础。【方法】根据植物cbf基因ap2/erebp保守区设计1对简并引物,利用pcr法从山葡萄cdna中扩增vacbf1基因的中间片段。再根据中间片段区域设计2对特异引物,采用反向pcr法扩增vacbf1基因的5′端和3′端序列。将中间片段与5′端和3′端序列拼接后得到山葡萄vacbf1基因的cdna全长序列,据此设计1对特异引物,pcr扩增vacbf1基因编码区的全长序列,并对其进行生物信息学分析。同时,利用荧光定量pcr分析山葡萄vacbf1基因在不同逆境胁迫(干旱、低温、盐胁迫)下的表达情况。【结果】成功地从山葡萄中克隆得到vacbf1基因cdna全长序列,其长度为762bp,编码253个氨基酸,在genbank注册号为dq517296。同源性分析证实,vacbf1属于cbf转录因子家族。荧光定量pcr分析发现,低温胁迫可以诱导山葡萄vacbf1基因高表达,而该基因的表达不受盐及干旱处理诱导。【结论】首次从山葡萄中克隆了vacbf1基因,并证实该基因参与了植物对低温胁迫的应答。 %K 山葡萄 %K cbf转录因子 %K 基因克隆与表达 %U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20131214&flag=1