%0 Journal Article %T 靶向猪瘟病毒ns3基因shrna干扰载体的构建与鉴定 %A 冶贵生? %A 张彦明? %A 徐 浩? %J 西北农林科技大学学报(自然科学版) %P 7-10 %D 2007 %X 利用rna干扰在线生物学软件分析猪瘟病毒ns3基因,设计针对ns3基因不同位置的小发卡rna(shorthairpinrna,shrna)干扰序列(其结构特征为正链(19nt)-环(9nt)-负链(19nt))。化学合成这些序列,并退火连接为双链干扰片段,将双链干扰片段定向克隆到干扰载体中,构建重组载体pgene-ns3-1,pgene-ns3-2和pgene-ns3-3,转化dh5a大肠杆菌感受态细胞,对转化产物进行kan+筛选,碱裂解法提取重组质粒,将酶切鉴定为阳性的质粒测序。结果显示,双链干扰片段克隆方向正确,序列中未出现核苷酸的插入,缺失等突变现象。表明靶向猪瘟病毒ns3基因shrna干扰载体构建成功。 %K 猪瘟病毒 %K ns3基因 %K rna干扰 %K 小发卡rna %U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20070302&flag=1