%0 Journal Article %T 牛奶中布鲁氏菌和单增李斯特菌双重pcr检测方法的建立 %A 程媛媛? %A 张彦明? %A 向 华? %J 西北农林科技大学学报(自然科学版) %P 54-60 %D 2011 %X 【目的】建立牛奶中布鲁氏菌和单增李斯特菌的双重pcr检测方法。【方法】根据布鲁氏菌is711序列和单增李斯特菌毒力因子hlya序列设计并合成引物,建立双重pcr检测方法,对其特异性、敏感性和重复性进行检测,并制备污染模型乳,通过直接检测、增菌后检测、细菌富集后增菌检测,确定最低检测限。【结果】建立了牛奶中布鲁氏菌和单增李斯特菌双重pcr检测方法,该方法特异性好、敏感性高、可重复性好。布鲁氏菌和单增李斯特菌单pcr检测最小dna质量浓度分别为0.282和3.33pg/μl,双重pcr检测最小dna质量浓度分别为2.82和33.3pg/μl。感染模型乳不经过增菌,布鲁氏菌和单增李斯特菌最低检测限分别为104和8×104cfu/ml;经过24h增菌,就可以检测到10cfu/ml的布鲁氏菌,经过12h增菌,就可以检测到8cfu/ml的单增李斯特菌;经过离心法富集细菌后再增菌,灵敏度可以扩大40~50倍,布鲁氏菌经24h增菌后最低检测限为10cfu/40ml,单增李斯特菌经12h增菌后最低检测限为8cfu/40ml。【结论】建立的双重pcr检测方法特异、灵敏、可重复,可单独或同时检测牛奶中的布鲁氏菌和单增李斯特菌,也可以用于其他产品中布鲁氏菌和单增李斯特菌的检测。 %K 布鲁氏菌 %K 单增李斯特菌 %K 双重pcr %K 牛奶 %U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20110311&flag=1