%0 Journal Article %T 鸡传染性法氏囊病病毒bj-10株vp2基因的克隆及原核表达 %A 王俊全? %A 王韦华? %A 刘桂梅? %J 西北农林科技大学学报(自然科学版) %P 38-42 %D 2013 %X 【目的】克隆鸡传染性法氏囊病病毒(ibdv)bj-10株vp2基因,构建其原核表达载体,并在大肠埃希菌中进行高效表达。【方法】根据ibdvvp2基因序列设计1对特异性引物,应用rt-pcr技术克隆ibdvbj-10株vp2基因;将目的基因插入pmd18-t连接载体,筛选出阳性重组质粒;将该质粒克隆至原核表达载体pet-32α中,转化入jm109,经iptg诱导表达,对产物进行sds-page电泳分析,确定iptg的最佳诱导表达时间和浓度。【结果】克隆到了全长1356bp的ibdvbj-10株vp2基因;pcr、酶切鉴定分析表明,成功构建了重组质粒pet-32α-vp2;sds-page电泳分析表明,在宿主菌jm109中成功表达了约为60ku的vp2蛋白;iptg诱导表达时间以4.5h为宜,诱导最佳浓度为0.8mmol/l。【结论】成功克隆了ibdvbj-10株vp2基因,并在大肠埃希菌中表达了vp2蛋白。 %K 鸡传染性法氏囊病病毒 %K vp2基因 %K 基因克隆 %K 原核表达载体 %U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20130907&flag=1