%0 Journal Article %T 兔出血症病毒vpg蛋白的原核表达及抗体制备 %A 王玢瑸? %A 哲名家? %A 刘光清? %J 西北农林科技大学学报(自然科学版) %P 45-49 %D 2013 %X 【目的】构建重组兔出血症病毒(rabbithemorrhagicdiseasevirus,rhdv)vpg(viralproteingenome-linked,vpg)蛋白基因的原核表达质粒,在大肠杆菌bl21(de3)中表达和纯化vpg蛋白,制备多克隆抗体,并检测抗体的基本特性。【方法】用pcr方法扩增rhdvvpg基因,将其克隆至原核表达载体pet-30a(+)中,转化大肠杆菌bl21(de3)菌株,用iptg诱导,使之重组表达vpg蛋白,并用镍柱亲和层析法纯化重组蛋白。pcr扩增获得了345bp的vpg基因,用纯化的重组vpg蛋白免疫试验兔,制备抗vpg的多克隆抗体,用westernblot检测其特异性。【结果】构建了pet-30a/vpg原核表达质粒,转化大肠杆菌bl21(de3)菌株后,成功表达了vpg蛋白。用该蛋白免疫试验兔后,制备的多克隆抗体能与vpg蛋白特异性反应。【结论】成功表达了rhdvvpg蛋白,并制备了特异性良好的多克隆抗体。 %K vpg %K 原核表达 %K 多克隆抗体 %U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20130308&flag=1