%0 Journal Article %T 人类胚胎干细胞与小鼠囊胚嵌合的探讨 %A 徐小明? %A 杜丽丽? %A 林 戈? %J 西北农林科技大学学报(自然科学版) %P 42-46 %D 2011 %X 【目的】探讨人类胚胎干细胞(humanembryonicstemcells,hescs)能否在小鼠胚胎环境中生存并参与其各个组织器官的分化,为hescs与小鼠囊胚嵌合的可行性研究提供依据。【方法】将154枚受精后3.5d(3.5dayspostcoitum,3.5dpc)icr品系小鼠囊胚随机分为3组:试验组(注射hescs)、模拟注射组(注射针仅刺破透明带及滋养层细胞,但不注射细胞和溶液)及对照组(未注射),于注射后培养24h统计囊胚完全孵化率。将稳定转染增强绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,egfp)的含有9~15个hescs的小细胞团块,显微注射入3.5dpcicr品系小鼠囊胚腔内,注射后分别于3,24,48,69,77,94和116h,在普通荧光显微镜下观察egfp阳性细胞的定位与动态分布情况,并将嵌合体胚胎移植入假孕母鼠子宫内,分别于移植后第4天和第6天处死孕鼠,普通荧光显微镜下观察egfp阳性细胞在整个小鼠胚胎中的分布情况。【结果】注射后24h,试验组和模拟注射组的囊胚完全孵化率分别为73.6%和77.1%,均极显著高于对照组(38.3%)(p<0.01),有88.9%(32/36)的胚胎中的hescs迁移并定位在小鼠内细胞团(icm)及其临近的滋养层细胞上;体外培养48h后,egfp阳性细胞数进一步减少;116h后,只有1枚胚胎仍残留3~4个egfp阳性细胞,且散在分布于icm克隆之外。体内发育试验结果显示,将43枚注射后的嵌合体囊胚移植入6只代孕母鼠子宫内,获得了22枚脱膜,有17枚脱膜中含有胚胎,其中形态正常胎儿14枚,没有胚胎含有egfp阳性细胞。【结论】hescs很难与小鼠囊胚正常嵌合。 %K 人类胚胎干细胞 %K 囊胚 %K 小鼠 %K 嵌合体 %U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20110207&flag=1