%0 Journal Article %T 日本血吸虫β-catenin基因的克隆及在不同发育阶段的表达水平 %A 李红飞? %A 王孝波? %A 冯新港? %J 西北农林科技大学学报(自然科学版) %P 33-41 %D 2011 %X 【目的】分析β-连环蛋白(β-catenin)在不同发育阶段日本血吸虫体内的表达特征,为研究wnt/β-catenin信号通路对虫体发育的调控奠定基础。【方法】以7d童虫cdna为模板,通过race技术获得日本血吸虫β-catenin基因全长cdna序列。采用实时定量pcr分析该基因mrna在不同发育阶段日本血吸虫体内表达水平的变化。以含有多个抗原表位的β-catenin部分cdna序列为模板,构建原核pet28a-β-catenin-310重组质粒,表达β-catenin蛋白。以纯化的原核表达产物为抗原,免疫balb/c小鼠制备抗血清,以此抗血清为一抗,通过westernblotting分析β-catenin蛋白在不同发育阶段日本血吸虫体内表达量的变化。【结果】β-catenincdna(genbank登陆号gu570442)序列全长2354bp,含完整的开放阅读框,编码671个氨基酸。β-catenin基因mrna表达水平在虫卵中最高,23d雌虫次之,在13d童虫和23d雄虫中也较高,约是23d雌虫的一半,在其他发育阶段mrna的表达水平相对较低。构建的重组质粒以包涵体形式表达β-catenin重组蛋白,该蛋白有很好的免疫原性。在日本血吸虫不同发育阶段β-catenin蛋白表达量的变化趋势与β-cateninmrna表达水平的变化基本一致。【结论】不同发育阶段日本血吸虫β-catenin基因mrna表达水平与β-catenin蛋白表达水平变化趋势基本一致;结合日本血吸虫发育特征,推测wnt/β-catenin信号通路可能对虫体的器官分化、虫卵的形成及卵胚发育等过程起着重要的调控作用。 %K 日本血吸虫 %K β-catenin基因 %K 克隆表达 %K wnt信号通路 %U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20110206&flag=1