%0 Journal Article %T 葡糖醋杆菌高静水压诱变株aflp体系的建立 %A 葛含静? %A 杜双奎? %A 林德慧? %J 西北农林科技大学学报(自然科学版) %P 171-177 %D 2011 %X 【目的】从dna分子水平研究葡糖醋杆菌及其经高静水压诱变后所得突变株的差异,优化建立了适合葡糖醋杆菌的aflp技术体系,为细菌纤维素产生菌的高静水压诱变育种提供技术支撑。【方法】以1株从自制醋中分离出来的细菌纤维素产生菌j-2及其经高静水压诱变后得到的高产细菌纤维素的突变株m438为材料,对选择性扩增程序的影响因素进行分析,优化建立葡糖醋杆菌的aflp酶切体系,并对适合葡糖醋杆菌高压诱变前后差异分析的引物组合进行筛选。【结果】酶切模板dna用量600ng,酶切时间8h,过夜连接(反应时间大于10h),预扩增产物最适稀释倍数为500倍,从24对aflp选择性扩增引物组合中筛选出了e-t/m-g为适合葡糖醋杆菌高静水压诱变前后差异分析的引物组合。供试2株菌的选择性扩增差异位点只有1处,经测序扩增片段长度为213bp,提交genbank比对,其与gluconacetobacterhanseniiatcc23769gxy0064基因组序列中24917~24723bp片段相似度为99%。【结论】所建立的aflp反应体系,适合葡糖醋杆菌j-2及其突变株m438的aflp分析。 %K 葡糖醋杆菌 %K 突变株 %K aflp %K 引物对筛选 %U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20110226&flag=1