%0 Journal Article %T 棉铃虫核型多角体病毒几丁质酶的原核表达及其协同增效作用 %A 项林平? %A 刘小芸? %A 田强强? %J 西北农林科技大学学报(自然科学版) %P 87-91 %D 2011 %X 【目的】在大肠杆菌中表达棉铃虫单粒包埋型核型多角体病毒(hearnpv)几丁质酶(chia),利用表达产物进行病毒增效作用研究,以明确杆状病毒chia对hearnpv的协同增效作用。【方法】用pcr方法扩增出不含n端信号肽编码序列的chia基因片段,分别克隆至原核表达载体pmal-p2x和pet-32a中,构建重组表达载体,并分别在大肠杆菌tb1和bl21(de3)中进行融合表达,测定融合蛋白对hearnpv的增效作用。【结果】克隆的基因片段经过测序后连接表达载体,成功构建了重组表达载体pmal-p2x-chia和pet-32a-chia。重组载体转化相应菌株并进行诱导表达,发现pmal-p2x-chia在大肠杆菌tb1中的表达量占细菌总蛋白的15.8%,其中20.0%为可溶性表达;pet-32a-chia在bl21(de3)中的表达量占细菌总蛋白的26.8%,其中30.2%为可溶性表达。选用pet-32a-chia在bl21(de3)中的表达产物作为增效蛋白,当表达的可溶性hearnpvchia的添加水平为1.0μg/ml时,其能够显著提高病毒毒力,棉铃虫的死亡率较对照提高36.6%。【结论】利用大肠杆菌表达的可溶性hearnpvchia,对hearnpv具有明显的增效作用。 %K 棉铃虫核型多角体病毒 %K 几丁质酶 %K 原核表达 %K 增效作用 %U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20110214&flag=1