%0 Journal Article %T 一种新型dna标记技术——限制性位点扩增多态性(rsap)的建立与优化 %A 杜晓华? %A 王得元? %A 巩振辉? %J 西北农林科技大学学报(自然科学版) %P 45-49 %D 2006 %X 了避开基于限制性酶切位点分子标记技术的dna酶切环节,简化其复杂的程序,试验以辣椒为材料,建立了一种新型dna标记技术——限制性位点扩增多态性(rsap),并对其反应体系进行了优化,对rsap适用性、重复性进行了检验。结果显示,rsap技术的引物为2条长度均为18bp的引物,引物的3’端为4~6个碱基的限制性酶切位点序列,接着是12~14个碱基的随机序列,2条引物的限制性位点和随机序列不同;pcr扩增的前5个循环采用35℃的退火温度,随后的35个循环采用48℃的退火温度;在25μl反应体系中,模板dna用量为20ng,mg2+浓度为2.5mmol/l,dntps浓度为0.2mmol/l,taqdna聚合酶用量为1.5u,2条引物浓度均为600nmol/l;rsap技术重复性好,适用性广泛,是一种操作简便、产率中等、稳定可靠的dna标记技术。 %K 限制性位点扩增多态性 %K dna标记技术 %K 蔬菜育种 %U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20060910&flag=1