%0 Journal Article %T 猪il-18基因真核表达质粒的构建及其表达产物的生物学活性 %A 邵攀峰? %A 崔沛? %A 郑兰兰? %J 西北农林科技大学学报(自然科学版) %P 85-90 %D 2009 %X 【目的】构建猪il-18的重组质粒,检测其表达产物的生物学活性,为进一步研究猪il-18基因的结构与功能奠定基础。【方法】通过pcr技术从含猪il-18全基因的克隆质粒中扩增猪il-18基因,定向克隆到真核表达载体pcdna3.1(+)中,构建重组质粒pil-18,在脂质体作用下转染猪肾pk15细胞。【结果】重组质粒pil-18经酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且连接、构建正确。通过rt-pcr检测,证实了猪il-18在pk15细胞中的表达;sds-page分析结果表明,表达产物是与猪il-18相符的约22ku的蛋白条带;westernblot证实,表达产物能与猪il-18单克隆抗体发生特异性反应。pil-18对h1亚型猪流感灭活疫苗免疫增强作用的研究表明,pil-18能够提高猪流感灭活疫苗诱发的细胞免疫应答。【结论】成功地构建了猪il-18的重组质粒pil-18,并在pk15细胞中获得了瞬时表达,且具有一定的免疫原性。 %K 猪白细胞介素18 %K 真核表达 %K 生物学活性 %K 猪流感灭活疫苗 %U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20091216&flag=1