%0 Journal Article %T 小鼠trim59蛋白多克隆抗体的制备、鉴定与初步应用 %A 姜 飞? %A 刘小林? %A 李喜莲? %J 西北农林科技大学学报(自然科学版) %P 11-16 %D 2009 %X 【目的】制备兔抗鼠三结构域蛋白59(tripartite-motif-containing59,trim59)多克隆抗体。【方法】利用pcr方法得到小鼠trim59基因片段,将其克隆至pgex-2t原核表达载体中,转入大肠杆菌bl21,iptg诱导表达gst-trim59融合蛋白。gst-trim59融合蛋白经亲和层析纯化浓缩后免疫新西兰大耳白兔,制备多克隆抗体,通过elisa测定兔抗鼠trim59多克隆抗体效价,用westernblot测定其特异性。用免疫组织化学方法检测trim59在小鼠前列腺癌组织中的表达。【结果】成功构建了pgex-2t-trim59原核表达重组质粒,并诱导表达出gst-trim59融合蛋白,免疫新西兰大耳白兔5周后获得多克隆抗体。elisa测定结果表明,trim59多克隆抗体效价为1∶106以上;westernblot分析表明,trim59多克隆抗体具有良好的特异性。免疫组织化学检测发现,trim59在小鼠前列腺癌组织细胞中高表达。【结论】成功地制备了特异性良好的兔抗鼠trim59多克隆抗体,其具有良好的免疫学活性,能够用于相关研究。 %K trim59基因 %K 多克隆抗体 %K 小鼠 %K 肿瘤 %U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20091203&flag=1