%0 Journal Article %T 抗cmv和tomvrnai载体的构建及加工番茄遗传转化 %A 乔亚红? %A 田桂英? %A 郑银英 %J 西北农林科技大学学报(自然科学版) %P 102-110 %D 2014 %X 【目的】利用农杆菌介导法将抗cmv和tomv的rnai表达载体pbi35stc12转入红番3号加工番茄,获得抗cmv和tomv的加工番茄植株,为加工番茄病毒病的防治奠定基础。【方法】采用rt-pcr扩增,选取新疆加工番茄cmv分离物ns041a复制酶第1051-1350bp序列和tomv分离物scs-2130/180ku复制酶第1920-2200bp序列,作为干扰片段cr12和to12。通过t克隆载体将cr12和to12连接成拼接片段tc12,构建成含反向重复结构拼接片段的rnai表达载体pbi35stc12。通过农杆菌介导法,用其转化红番3号加工番茄,经过筛选、pcr检测得到转基因植株。【结果】成功构建了抗cmv和tomv的rnai表达载体pbi35stc12,并用其转化番茄植株,从转化的1500个愈伤组织中获得33株再生植株,利用pcr对再生植株进行检测,显示从33株再生植株中获得了19株转基因植株,转化率为1.26%。【结论】构建了抗cmv和tomv的rnai表达载体pbi35stc12,用其转化红番3号加工番茄,获得了转基因植株。 %K cmv %K tomv %K rnai载体 %K 加工番茄 %K 遗传转化 %U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20140117&flag=1