%0 Journal Article %T 猪传染性胃肠炎病毒荧光定量rt-pcr检测方法的建立 %A 董玲娟? %A 张彦明? %A 何 雷? %J 西北农林科技大学学报(自然科学版) %P 13-19 %D 2012 %X 【目的】建立一种能检测猪传染性胃肠炎病毒(tgev)含量的荧光定量rt-pcr方法,为猪传染性胃肠炎(tge)的诊断和防治提供技术支持。【方法】根据tgevth98株的n基因序列设计1对特异性引物,扩增出目的片段,连接克隆载体后构建质粒标准品;对荧光定量的循环条件进行优化,建立猪传染性胃肠炎病毒荧光定量rt-pcr检测方法,对其重复性、特异性进行检测,并与普通pcr检测方法进行比较,最后应用该方法对采自陕西杨凌周边的30份临床样品进行检测。【结果】成功构建了质粒标准品,建立了检测猪传染性胃肠炎病毒的荧光定量rt-pcr方法,该方法特异性高、重复性好、敏感性比普通pcr检测方法高2个数量级,对质粒标准品的线性检测范围为1.0×107~1.0×101拷贝/μl。用建立的检测方法对从陕西杨凌周边猪场采集的30份样品进行检测,检出4份阳性,与普通pcr检测方法符合率为100%。【结论】建立的tgev荧光定量rt-pcr方法敏感性高、特异性好、省时省力,可以对猪传染性胃肠炎病毒进行快速检测。 %K 猪传染性胃肠炎病毒 %K 荧光定量rt-pcr %K 质粒标准品 %U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20120203&flag=1