%0 Journal Article
%T 桔梗rapd-pcr体系的正交优化及引物筛选
%A 夏晓娟？
%A 王 丽？
%A 魏建和？
%J 西北农林科技大学学报(自然科学版)
%P 193-198
%D 2008
%X [目的]建立桔梗rapd-pcr反应的最佳体系并应用于桔梗遗传图谱的构建.[方法]以2个桔梗亲本gs16和gs106的叶片dna为模板,对桔梗dna的提取及对影响桔梗rapd-pcr扩增的重要参数进行优化试验,并从530个随机引物中筛选出在2个亲本间具多态性的引物.[结果]叶片研磨后用蒸馏水预洗及2次沉淀时加入3mol/lnacl(ph5.2)溶液,提取的基因组dna纯度较高.优化的最佳反应体系总体积为25μl.内含ddh2o12.4μl、10×buffer2.5μl、引物0.3μmol/l、dntps200μmol/l、mg2+2.5mmol/l、taqdna聚合酶0.5u、dna模板40ng;反应程序为:94℃预变性4min;94℃30s,35.3℃1min,72℃2min,40次循环;72℃10min.按此优化rapd条件成功地从530个随机引物中筛选出了115个在两亲本间具多态性的引物.[结论]改良的ctab法能成功用于桔梗基因组dna提取,建立的最佳反应体系可用于桔梗遗传图谱的构建.
%K 桔梗
%K rapd
%K 体系优化
%K 正交设计
%K 引物筛选
%U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20081033&flag=1