%0 Journal Article
%T 经猪血管内皮细胞多次传代的csfve2基因的遗传变异研究
%A 温元鹏？
%A 张彦明？
%A 冶贵生？
%J 西北农林科技大学学报(自然科学版)
%P 31-35
%D 2008
%X [目的]研究猪瘟病毒(csfv)e2基因在猪脐静脉血管内皮细胞中多次传代后的遗传变异情况,为csfv的致病机理研究提供理论依据。[方法]分离并培养猪脐静脉血管内皮细胞,接种猪瘟病毒石门株脾毒后继续培养,染毒细胞经3次连续传代后全部死亡、脱落,收集每代细胞并提取总rna,采用rt-pcr方法扩增csfve2基因。将获得的目的基因克隆入t载体并转化dh5α感受态细胞,提取重组质粒,进行pcr和bamhⅰ、hindⅲ酶切鉴定,将阳性的重组质粒进行测序,并用dnastar软件进行序列分析。[结果]扩增出了e2基因,重组质粒pmd18-t-e2的pcr和双酶切鉴定结果表明,e2基因与pmd18-t载体连接成功。各代猪脐静脉血管内皮细胞中csfve2基因之间的核苷酸序列同源性为99。4%～99。9%,氨基酸序列同源性为98。9%～99。8%；各代猪脐静脉血管内皮细胞中的csfve2基因与标准病毒石门株之间的核苷酸序列同源性为98。9%～99。3%,氨基酸序列同源性为98。9%～99。2%。[结论]猪瘟病毒石门株在猪血管内皮细胞上传代的过程中e2基因无明显的变异,能保持遗传的稳定性。
%K 猪瘟病毒
%K e2基因
%K 猪脐静脉血管内皮细胞
%K 序列分析
%U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20080806&flag=1