%0 Journal Article %T 利用转基因番茄表达人成纤维细胞生长因子21(fgf21) %A 付宏岐? %A 李海燕? %A 庞实锋? %J 西北农林科技大学学报(自然科学版) %P 163-170 %D 2011 %X 【目的】在番茄中表达人成纤维细胞生长因子-21(fibroblastgrowthfactor-21,fgf21),为利用植物反应器规模化生产fgf21奠定基础。【方法】以甘露糖-6-磷酸异构酶基因(pmi)作为转基因植物的选择标记,将人源fgf21基因克隆至表达载体pcambia1390rⅱ(简写为p1390rⅱ)上,构建重组表达质粒p1390rⅱmfgf21。采用冻融法将质粒p1390rⅱmfgf21转入根瘤农杆菌eha105,叶盘法转化番茄(lycopersiconesculentum)“中蔬6号”,采用pcr检测、southern杂交筛选转基因番茄阳性植株,并对fgf21蛋白在转基因番茄叶片中的表达进行了westernblot分析。【结果】成功构建了带pmi安全选择标记基因的植物双元表达载体p1390rⅱmfgf21,在番茄中初步建立了以pmi为选择标记基因的遗传转化体系,共获得了26株转基因番茄植株,其中5株为阳性克隆,转化率为19.2%。采用pcr扩增和southernblot分析进行检测,结果表明,重组fgf21基因已整合到转基因番茄基因组中。westernblot分析检测结果显示,fgf21蛋白在转基因番茄叶片中有一定水平的表达,并具有良好的抗原性。【结论】获得了以pmi为选择标记成功表达fgf21蛋白的转基因番茄遗传体系。 %K 农杆菌 %K 成纤维细胞生长因子-21 %K 甘露糖-6-磷酸异构酶 %K 生物反应器 %K 番茄 %K 遗传转化 %U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20110726&flag=1