%0 Journal Article %T 2种不同无色孔雀石绿单克隆抗体的制备 %A 陈 力? %A 胡 鲲? %A 姜有声? %J 西北农林科技大学学报(自然科学版) %P 28-34 %D 2011 %X 【目的】制备无色孔雀石绿(lmg)单克隆抗体,并分析其生物学特性,为建立lmg残留的免疫学检测方法奠定基础。【方法】通过改进的碳二亚胺法制备无色孔雀石绿牛血清白蛋白偶联物(lmg-bsa)与副品红牛血清白蛋白偶联物(pa-bsa),用紫外扫描、质谱法方法鉴定偶联物。利用制备的lmg-bsa与pa-bsa作为免疫原,免疫4~5周龄balb/c小鼠,用杂交瘤技术制备lmg单克隆抗体,并对其效价、亲和力、灵敏度和特异性等进行分析。【结果】lmg-bsa与pa-bsa的偶联比率分别为7∶1和37∶1;经间接酶联免疫吸附(elisa)法筛选,由lmg-bsa和pa-bsa抗原各获得1株杂交瘤细胞,分别命名为l-1、p-1。这2株细胞株分泌的单克隆抗体纯化后,经测定效价分别为1.25×105和6.25×106,亲和力常数分别为4.92×109和1.44×108l/mol,半抑制质量浓度(ic50)分别达8.03和10.5μg/l。l-1分泌的单克隆抗体仅与孔雀石绿存在交叉反应,交叉反应率为100%;p-1分泌的单克隆抗体与孔雀石绿及副品红均存在交叉反应,交叉反应率分别为80%与100%。【结论】成功获得了2株lmg单克隆抗体,其均可用于水产品中lmg残留的快速检测。 %K 无色孔雀石绿 %K 副品红 %K 半抗原 %K 抗体 %K 免疫 %U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20110705&flag=1