%0 Journal Article %T 人胰岛素样生长因子-ⅰ基因农杆菌工程菌株的构建 %A 周 鹏? %A 王跃进? %A 贺普超? %J 西北农林科技大学学报(自然科学版) %P 19-23 %D 2001 %X 采用固相亚磷酸三酯法人工化学合成了人胰岛素样生长因子-ⅰ(huigf-1)基因的4条寡核苷酸片段,再通过片段1,2与3,4末端互补配对和klenow酶促补平及酶切连接成为完整的huifg-idna片段,用ecorⅰ/pstⅰ酶切后克隆于pgemt-easyvector,经测序证明所得dna序列与设计的序列完全一致,选用植物偏爱密码子校正了启始密码子atg下游的6个密码子,并在atg处增加kozak序列后,插入pbi121的bamhⅰ/sacⅰ位点,构建了以35s为启动子的植物表达载体,以hindⅱ/ecorⅰ切下35s-kozak-igf-ⅰ-nos(ter)。插入pcambia2300之hindⅲ/ecorⅰ位点,构建成huigf-1植物表达载体,通过cacl2直接转化法将表达载体导入农杆菌eha105(rif.r),并以菌落原位杂交技术和dnadotblot对重组农杆菌进行了筛选,所获得的重组农杆菌菌培养huigf-i药用植物奠定地基础。 %K 胰岛素样生长因子-ⅰ %K 化学合成 %K 植物表达载体 %K 重组农杆菌 %K 药用植物 %U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20010305&flag=1