%0 Journal Article %T 牛ipscs向神经细胞的诱导分化 %A 吕长荣? %A 陈冬梅? %A 辛晓玲? %J 西北农林科技大学学报(自然科学版) %P 7-13 %D 2010 %X 【目的】通过类胚体介导体外自由分化与诱导分化,验证所建立的牛诱导性多能干细胞(bovineinducedpluripotentstemcells,bipscs)能否分化为外胚层的神经细胞。【方法】将bipscs悬浮培养以制备类胚体,通过类胚体介导使bipscs在添加全反式维甲酸(ra)和β巯基乙醇(β-me)诱导体系中分化为神经细胞,比较其诱导效率;提取不同诱导体系的分化细胞与类胚体的总rna,利用rtpcr方法鉴定分化细胞中神经细胞特异性基因的表达。【结果】培养的bipscs集落呈球形,中央隆起,周围界限清晰,与胚胎干细胞集落形态类似。bipscs碱性磷酸酶(ap)染色为阳性,并表达ssea-4干细胞特异性表面蛋白。bipscs通过类胚体介导分化,在未添加化学诱导物的条件下,可自由分化为nestin、gfap与nse阳性神经细胞,其阳性细胞率分别为(15.14±1.13)%,(6.25±0.35)%和(5.45±0.62)%;bipscs在ra诱导组中分化的神经细胞的数量最多,诱导后表达nestin、gfap和nse细胞的阳性率分别为(49.56±2.33)%,(16.58±1.28)%和(13.66±2.21)%;在β-me诱导组中,表达nestin的阳性细胞率为(42.23±1.25)%。2个诱导组的诱导效率与无化学诱导物组有显著差异(p<0.05)。rt-pcr检测结果显示,不同诱导体系获得的分化细胞均能扩增到神经细胞特异性基因nestin和βⅲ-tubulin片段,产物长度与预期结果完全一致。【结论】bipscs在体外具有向神经细胞发育的能力;ra是诱导bipscs向神经细胞分化的良好诱导物。 %K 诱导性多能干细胞 %K 神经细胞 %K 诱导分化 %K 发育多能性 %K 牛 %U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20100702&flag=1