%0 Journal Article %T 香蕉枯萎病菌2个生理小种pl基因真核表达载体的构建与表达 %A 董章勇? %A 秦世雯? %A 王振中? %J 西北农林科技大学学报(自然科学版) %P 102-106 %D 2012 %X 【目的】构建香蕉枯萎病菌1号小种(foc1)和4号小种(foc4)果胶裂解酶(pectatelyases,pl)基因的真核表达载体,并进行诱导表达,为进一步研究pl在病原菌致病过程中的作用奠定基础。【方法】将质粒pmd18-pl-foc1、pmd18-pl-foc4和真核表达穿梭载体ppiczαa进行ecorⅰ和xbaⅰ双酶切反应,回收目的片段连接,转化至dh5α进行筛选扩繁,对菌落进行pcr鉴定后抽提质粒进行pcr和ecorⅰ、xbaⅰ双酶切鉴定。将阳性载体线性化后电击转化毕赤酵母smd1168感受态细胞,用甲醇进行诱导表达,对表达产物进行sds-page分析。【结果】成功构建了foc1和foc4pl基因的真核表达载体ppiczαa-pl-foc1和ppiczαa-pl-foc4,经甲醇诱导表达后分别获得了重组的pl蛋白,其分子质量约为23.4ku。【结论】foc1和foc42个香蕉枯萎病菌小种的pl基因在酵母中得到了成功表达。 %K 香蕉枯萎病 %K 香蕉枯萎病菌 %K 果胶裂解酶 %K 载体构建 %K 真核表达 %U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20120416&flag=1