%0 Journal Article
%T 苹果蠹蛾β-actin基因cdna的克隆、序列分析及mrna表达稳定性检测
%A 杨雪清？
%A 张雅林？
%J 西北农林科技大学学报(自然科学版)
%P 135-140
%D 2014
%X 【目的】克隆苹果蠹蛾(cydiapomonella(l.))的β-actin基因cdna全长，确定其作为内参基因的可能性。【方法】运用rt-pcr和race技术分段扩增苹果蠹蛾β-actin基因5′和3′非编码区及保守区，拼接后根据所获序列设计引物，完整克隆苹果蠹蛾β-actin基因。利用生物信息学软件对苹果蠹蛾β-actin基因编码的蛋白质进行分析预测；通过实时定量pcr和半定量pcr方法，检测不同发育阶段以及杀虫剂处理后苹果蠹蛾β-actinmrna的表达情况。【结果】苹果蠹蛾β-actin基因cdna全长1466bp(genbank登录号为kc832921)，包括5′非编码区67bp、3′非编码区268bp和开放阅读框1131bp，编码一个由376个氨基酸残基组成的蛋白质。推导的蛋白质相对分子质量为41.7937ku，等电点为5.29，含有3个actin蛋白家族的典型识别特征以及6种类型的特定功能位点，氨基酸序列与其他昆虫β-actin一致性高达99%。实时定量pcr和半定量pcr结果表明，β-actin基因在苹果蠹蛾发育不同时期以及杀虫剂处理后表达量无显著差异(p>0.05)。【结论】苹果蠹蛾β-actin基因可作为可靠的内参基因应用于基因mrna的表达定量研究。
%K 苹果蠹蛾
%K β-actin基因
%K race技术
%K 实时定量pcr
%U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20141121&flag=1