%0 Journal Article %T 人白细胞介素-3基因翻译起始区的改造提高其在大肠杆菌中的表达水平 %A 杨立宏* 陈常庆** 高冕 苏成芝* %J 生物工程学报 %D 1995 %X 为了提高人白细胞介素-3(bhil-3)在大肠杆菌中的表达,在计算机辅助下,设计合成了pcr突变引物,用于改造起始密码aug上下游序列,并在不改变5’端氨基酸编码的前提下,尽可能选用大肠杆菌高频使用的密码子。将经改造后的hil-3cdna和翻译起始区置于pl启动子之下,转入大肠杆菌tapl06,经42℃热诱导后.获得表达产物,提高表达水平近一倍,表达量达到菌体总蛋白量的30%左右。表达产物经westernblot验证,经pvdf膜转移后进行n端顺序分析,证明前15个氨基酸正确,产物经包涵体纯化后,纯度提高至80%以上,初步复性后能明显促进hil-3依赖细胞的生长。 %K 人白细胞介素-3基因 %K 大肠杆菌中表达 %K pcr %K 转录起始区 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=95040297&flag=1