%0 Journal Article %T 绵羊follistatin基因表达及其结构域的功能分析 %A 张宁? %A 张雪梅? %A 刘明军? %A 谭立新? %J 生物工程学报 %P 1050-1056 %D 2010 %X 为研究羊follistatin基因的功能,提取了绵羊卵巢总rna,通过rt-pcr方法获得羊follistatincdna的完整开放阅读框(1038bp)。去除信号肽序列后与原核表达载体pet41a连接,构建重组表达质粒pfssig?,经大肠杆菌诱导表达获得fssig?蛋白(66kda)。通过rt-pcr克隆了包含n端和结构域1的follistatin突变体(fsn+d1),将fsn+d1片段插入慢病毒载体(plex-mcs)构建了pfs-n+d1慢病毒重组表达质粒。在293t细胞中进行慢病毒的包装,再感染绵羊肌肉原代细胞,得到稳定表达fsn+d1的肌肉细胞系,通过细胞生长曲线结果显示稳定表达fsn+d1的肌肉细胞明显比正常肌肉细胞增殖快,且差异极显著(p<0.01),表明绵羊fsn+d1结构域有促进肌肉细胞生长的功能。 %K 绵羊follistatin基因 %K 原核表达 %K 慢病毒 %K 细胞生长曲线 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc10001050&flag=1