%0 Journal Article
%T 炭疽杆菌噬菌体裂解酶基因在大肠杆菌中的表达及鉴定
%A 李晓静？？
%A 张豪
%A 付学奇
%A 李彦英
%A 陈璟
%A 李玉玲
%A 方宏清
%A 陈惠鹏*
%J 生物工程学报
%D 2005
%X 利用pcr方法扩增炭疽杆菌噬菌体裂解酶(γlysin)基因,克隆至大肠杆菌表达载体pet22b中,经菌落pcr筛选、序列测定和酶切鉴定证实表达载体pet22b-γlysin构建成功,并在escherichiacolibl21(de3)中获得了高表达。目的蛋白约占菌体总蛋白的40%,5l发酵罐中的产酶水平高达15gl。菌体经超声破碎,制备无细胞抽提液,streamlinesp和sphp柱层析以及sephacryls-100凝胶过滤三步纯化,得到分子量为27kd单一条带的目的蛋白,薄层扫描分析显示其纯度大于95%。目的蛋白的收率为19.1%,纯化倍数为350。生物活性鉴定重组的γ噬菌体裂解酶具有特异性:可快速裂解炭疽杆菌,比活为1400umg左右;而对大肠杆菌、枯草杆菌及蜡样芽孢杆菌没有裂解活性。
%K 噬菌体裂解酶
%K 炭疽杆菌
%K 大肠杆菌
%U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=05020216&flag=1