%0 Journal Article
%T 抗cd3/抗cd20双特异性单链抗体的表达、鉴定及活性分析
%A 于蕊
%A 李世崇
%A 吴本传
%A 刘红
%A 叶玲玲
%A 陈昭烈*
%J 生物工程学报
%D 2005
%X 设计并合成多个60bp左右的dna小片段,经重叠延伸pcr扩增获得1640bp的抗cd3抗cd20双特异性单链抗体完整基因片段,将其克隆入真核定点表达载体pcdna5frt中,脂质体法转染flp-intmcho细胞,获得稳定表达细胞株,目的蛋白在上清中的表达量约为300μg/l。采用ni_nta柱对其进行了纯化,经sds-page蛋白电泳及western-blot分析结果表明,含组氨酸标签的目的蛋白的分子量约为70kd,与预期结果一致。活细胞间接免疫荧光实验和玫瑰花环实验证明抗cd3抗cd20双特异性单链抗体具有与ramous(cd20+)及jurkat(cd3+)细胞特异性结合的活性。光学显微镜下可以观察到抗cd3抗cd20双特异性单链抗体可以有效介导人外周血淋巴细胞裂解b淋巴瘤细胞ramous。以上工作为进一步了解抗cd3抗cd20双特异性单链抗体的体内体外生物学活性奠定了基础。
%K 双特异性单链抗体
%K 表达
%K 鉴定
%K 活性分析
%U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=05020289&flag=1