%0 Journal Article %T intein介导的重组昆虫毒素bmkit在大肠杆菌中的可溶性表达、纯化及活性分析 %A 许成钢? %A 范晓军? %A 张志云? %A 付月君? %A 梁爱华? %J 生物工程学报 %D 2007 %X 为获得重组蝎昆虫毒素bmkit,通过pcr方法在bmkit基因的3′端融合了编码6个组氨酸残基的核苷酸序列,将其插入原核表达载体ptwin1的内含肽sspdnabintein基因下游的多克隆位点(mcs)。将获得的表达质粒转化大肠杆菌bl21(de3)中,用iptg诱导融合蛋白表达。用ni-nta亲和层析柱从菌体裂解液中纯化了cbd-intein-bmkithis6融合蛋白,并在柱上诱导intein自剪切,成功去除融合子cbd-intein。通过superdex75凝胶过滤层析获得了纯度达95%以上的bmkithis6蛋白,该蛋白不仅具有正确的二级结构而且有生物活性。 %K 东亚钳蝎昆虫毒素 %K 原核表达 %K intein自剪切 %K 虫试实验 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=07060989&flag=1