%0 Journal Article %T tpo模拟肽与人igg1fc片段的融合表达及其生物学特性研究 %A 李越希* 李朝 陶开华 贾向红 程度胜 黄培堂 %J 生物工程学报 %D 2002 %X 依据本室获得的人tpo模拟肽序列,合成了该模拟肽的dna序列,分别连接至4种不同长度的人igg1fc基因片段的5′端,并克隆至质粒表达载体pet28a(+),转化大肠杆菌bl21(de3),筛选获得了4种重组工程菌,其中3种分别高效表达了3种不同长度的融合蛋白,而第4种工程菌未表达。表达的3种融合蛋白的分子量分别约为28kd、12kd和12kd,表达量约占菌体蛋白总量的30%左右,纯化获得了3种tpo模拟肽融合蛋白。3种融合蛋白均有较好的体外活性,维持tpo依赖细胞ba/f3-mp1生长的ec50分别为:13、10、10nmol/l。用血小板减少症小鼠动物模型,测定了它们的体内活性,3种融合蛋白均有升高血小板和缩短血小板恢复时间的功能,分别比tpo模拟肽活性提高了18、8、8倍;而对白细胞及红细胞无显著影响。分别用3种融合蛋白免疫balb/c小鼠,均未刺激小鼠产生抗tpo模拟肽抗体,并显示了较好的应用潜力。 %K 人tpo模拟肽 %K 融合表达 %K 纯化 %K 体内外活性 %K 免疫原性 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=02040424&flag=1